¿Qué tipo de configuración de cámara se requiere para tomar fotos de luciferase?

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Estoy trabajando con luciferase, que tiene una longitud de onda azul de 480 nm y quiero poder tomarle una foto. El problema es que puedo ver la luciferasa brillando en todo su esplendor frente a mí, pero no importa cuánto lo intente, no puedo tomar una foto de la luciferasa con mi DSLR (Nikon D80) usando una lente Nikon de 50 mm. y una lente Nikon de 35 mm. He intentado eliminar los filtros (Nikon L37 y Hoya UV).

Tengo curiosidad si me falta una lente / filtro determinado o si debería disparar usando una configuración de iluminación diferente. Ya estoy exponiendo 30 "a f / 22 en ISO 1600. ¿Quizás más?

bobthejoe
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¿Cuál es su configuración de iluminación?
MikeW
Sospecho que se necesitan tiempos de exposición mucho más largos (. Y en la oscuridad absoluta. Igual que fotografiar estrellas por la noche, por ejemplo. Supongo que un EV -5 / -6, por lo que necesita muchas más paradas para corregir eso. Así que ajuste el ISO en 400 por ejemplo y comenzar con un tiempo de exposición de 1 minuto en un diafragma F / 4.0. ¿Algo visible? Disminuir el tiempo en 1 parada, nada visible. Incrementar a 800 iso, y así sucesivamente, jugar con ISO y tiempo para mantener la calidad.
Caspar Kleijne
En una habitación oscura. ¿Cómo se compara el brillo con los marcadores luminosos de hora en un reloj de pulsera? Ver mi imagen a continuación. Sospecho que tu luciferasa debería ser más brillante que esto.
Russell McMahon
La luciferasa en realidad será más opaca que un reloj de pulsera (dependiendo de las concentraciones). Estoy usando una habitación completamente oscura.
bobthejoe
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No, no un idiota, fuiste lo suficientemente inteligente como para encontrarnos en busca de ayuda jajaja! Me alegra que esté funcionando ahora.
MikeW

Respuestas:

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Esa longitud de onda ciertamente está dentro del espectro que puede capturar con cualquier lente, con o sin filtros. Los sensores digitales capturan entre 350-1000 nm. Si está brillando, entonces querrás que esa sea tu fuente de luz principal. Cualquier luz adicional que le arrojes va a diluir el brillo de tu sujeto y hará que sea más difícil de ver.

¿Qué apertura estás usando? A menos que esto sea increíblemente tenue, no puedo imaginar que 30 "no capture algo a menos que esté usando una abertura muy pequeña.

¿Estás haciendo esto en una habitación oscura con un fondo oscuro? ¿Qué ves en tus exposiciones de 30 "?

A través de prueba y error, puede hacer un rango de velocidades de obturación (e ISO) para tratar de afinar un buen valor de exposición. Si puede verlo con los ojos, debería poder fotografiarlo sin un equipo especial.

MikeW
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Estoy usando f22, ISO 1600. También me confunde.
bobthejoe
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Oh dios, f / 22 - ahí está tu problema. f / 22 con 30 segundos definitivamente no lo va a conseguir. Abra todo lo ancho ( números f más bajos ) que pueda, al menos para comenzar. f / 22 básicamente significa que hay un tamaño de agujero de luz que atraviesa.
rfusca
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Si tiene otra luz presente, puede "eliminar" fácilmente la luminiscencia de bajo nivel. No debe tener otra luz para comenzar.

Concéntrese con una luz encendida. Utilice el enfoque manual o, si su cámara lo permite, configure el enfoque manual, cambie temporalmente a AF, enfoque y luego vuelva a MF para enfocar la cámara.

Luego apague otras luces para que la luciferasa sea la única fuente de luz, exponga desde allí y vea lo que obtiene.

Si eso no funciona, la exposición manual y el enfoque manual le permiten controlar lo que hace la cámara y exponer en un rango de exposiciones probables.

Intenté fotografiar mi esfera de reloj de pulsera luminosa no especialmente brillante en total oscuridad. A 250 mm y a una distancia aproximada de 500 mm, el reloj llenó 1/3 del ancho de la exposición del marco durante 6 segundos a f5.6 a 800 ISO. Los marcadores de hora individuales, que no son muy brillantes a la vista de la habitación, brillan intensamente en la foto cuando son la única fuente de luz.

Por lo tanto Enfocarse "podría haber sido mucho mejor [tm] :-)

6S, f5.6, ISO800.

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Las preguntas clave son: ¿está utilizando otra iluminación y qué ESTÁ viendo en sus imágenes?

Estas muchas imágenes de luciferasa sugieren un nivel de luz razonable y no parecen ser difíciles de fotografiar.

Russell McMahon
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